Фолликулярные клетки яичника


Фолликулярные яичники: что это такое, диагностика, лечение

Фолликулярные яичники (второе название , МФЯ) – это особая структура яичника. Она характеризуется тем, что на картине УЗИ прослеживается большое количество фолликулов. Данная особенность не является отклонением, диагнозом или патологией. Однако при наличии патологических симптомов возникает необходимость лечения и дополнительных исследований.

В норме у каждого яичника ежемесячно вырабатывается 4-8 фолликулов, 1-2 из которых становятся доминантными, а с их разрывами наступает овуляция. Неправильная работа коры надпочечников приводит к гормональному дисбалансу, нарушающему работу репродуктивной функции. Если гормональный сбой оказывается серьезным, начинает развиваться заболевание поликистоз, относящееся к бесплодию.

Что такое фолликулярные яичники? Некоторые пациентки в поисках информации в интернете натыкаются на статьи, где ошибочно путают термин &#171,фолликулярные яичники&#187, с другим медицинским термином , &#171,фолликулярная киста&#171,. Это вводит их в заблуждение. На самом деле, под фолликулярными яичниками подразумевается МФЯ (мультифолликулярные яичники), по сути это одно и то же.

Беременность при данной патологии

Фолликулярные яичники могут стать препятствием для беременности из-за переизбытка фолликулов. Если их становится много, то ни один из них не успевает дозревать. Внешние проявления следующие:

  • отсутствие менструации,
  • выработка бесплодных яйцеклеток.

В большинстве случаев зачатие становится сложным из-за серьезных отклонений и появления поликистоза на фоне фолликулярных яичников. Чтобы избежать развития заболевания, необходимо обратить внимание на следующие необходимые действия:

  • оперативная диагностика и лечение новообразований, препятствующих зачатию. Это могут быть самые разнообразные кисты, опухоли и пр.,
  • обследование гормонального фона. Недостаточность прогестерона или переизбыток мужских гормонов представляют серьезную опасность. Они не только препятствуют зачатию, но и способны спровоцировать выкидыш, замирание плода и пр.

У фолликулярных яичников без отклонений, как правило, отсутствуют симптомы. Диагностировать МФЯ можно только по УЗИ. Факторы, провоцирующие появление МФЯ как особенность структуры яичника, следующие:

  • генетика,
  • недостаточность ЛГ, избыток пролактина и прочие нарушения эндокринной системы,
  • половое созревание,
  • резкие скачки веса,
  • грудное кормление,
  • побочные эффекты после противозачаточных препаратов,
  • стресс.

Настоятельно рекомендуется посещать гинеколога, контролировать гормональную систему и вес. Кроме того, абстрагирование от стресса, правильный режим дня, питания, хорошее настроение способны дать положительный эффект в борьбе за беременность.

Профилактика

Предотвратить появление фолликулярных яичников можно с помощью следующих профилактических мер:

  1. Регулярное прохождение ультразвукового исследования.
  2. Внимательное отношение к весу, предотвращение резких скачков, провоцирующих гормональные сбои.
  3. Соблюдение правильного питания, употребление пищи, богатой микроэлементами, витаминами и клетчаткой.
  4. Регулярные физические нагрузки, начиная с минимальной загруженности, постепенно повышая сложность упражнений.
  5. Прием гормональных препаратов и контрацептивов только после детального обследования эндокринной системы.

Соблюдая указанные рекомендации, получится максимально снизить риски развития фолликулярных яичников и заболеваний, возникающих вследствие данной особенности. О том, как лечить фолликулярные яичники читайте далее.

Терапия заболевания

Лечение фолликулярных яичников само по себе не требуется. Однако если их природа спровоцирована гормональными нарушениями, то врач-эндокринолог назначает терапию для ликвидации причины, вызвавшей недуг.

Для начала корректируют нарушения работы эндокринной системы: вырабатывается индивидуальная схема физических нагрузок, диета и действия, направленные на снижение веса, если присутствуют лишние килограммы.

Если сбой вызван использованием контрацептивов, пациентка должна от них отказаться.

Второй этап направлен на восстановление овуляции и гормонального фона с помощью препаратов, в зависимости от того, какой гормон неправильно работает:

  1. Аналоги эстрогена или фитоэстрагены. Если эстроген понижен.
  2. Аналоги прогестерона, прописываемые во вторую фазу цикла. Если прогестерон понижен.
  3. Различные сильнодействующие препараты при повышении тестостерона.

При необходимости лечение продлевается до третьего этапа, на котором стимулируют овуляцию.

Длительность терапии – от трех до пяти месяцев.

При возникновении серьезных патологий, не поддающихся медикаментозной терапии, лечение может стать хирургическим.

Народные средства

Лечение травами разрешено только после одобрения врача, в противном случае повышается риск осложнений. Эффективные рецепты:

  1. Шалфей. 1 ч. л. заваривается в стакане воды. Настаивается 15 минут. Пить 2 р/сутки в течение 7-12 дней.
  2. Боровая матка. 1,5 ч. л. заваривается в стакане кипятка. Настаивается 10 минут. Употреблять по 3 ч. л./сутки. Принимать 14 дней, затем прекратить на 2 недели. После перерыва вновь пить по той же схеме в течение полугода.

Обычно фолликулярным яичникам не требуется лечения, т. к. они не препятствуют зачатию. Однако, если стоит вопрос о невозможности забеременеть в течение полугода или возникли заболевания органов малого таза, необходимо вовремя обратиться к врачу для устранения проблемы. Соблюдая профилактические меры можно избежать длительного лечения, бесплодия и других неприятных последствий.

Загрузка...

Развитие яичников и фолликулов

Введение

Гистологический вид органов, составляющих женскую репродуктивную систему, претерпевает циклические структурные изменения, не являющиеся патологическими. Эти органы включают яичник и матку, и гистологические изменения в этих органах в основном обусловлены четырьмя гормонами: фолликулостимулирующим гормоном (ФСГ), лейтенизирующим гормоном (ЛГ), эстрогенами и прогестероном. На этой странице будут описаны гистологические изменения яичников в течение менструального цикла.

Яичник

Яичник человека состоит из внутреннего мозгового вещества и внешней коры с нечеткими границами. В мозговом веществе находятся кровеносные сосуды и нервы, а кора головного мозга занята развивающимися фолликулами. Поперечный разрез яичника выявит фолликулы на разных стадиях развития. В следующих разделах будут описаны гистологические особенности каждой стадии развития фолликулов и основные функциональные изменения в клетках, составляющих фолликулы.

Первородный фолликул

Фолликул яичника проходит несколько различных фаз, прежде чем он выпустит свою яйцеклетку.В течение первых пяти месяцев развития в яичнике плода формируется конечное количество примордиальных фолликулов. Эти фолликулы состоят из ооцитов, окруженных одним слоем плоских фолликулярных клеток. Эти примордиальные фолликулы остаются в процессе первого мейотического деления. В период полового созревания они начинают развиваться дальше и становятся первичными фолликулами.

Ранний первичный фолликул

В начале каждого менструального цикла запускается ограниченное количество примордиальных фолликулов.Первая очевидная гистологическая стадия - это ранний первичный фолликул, который состоит из центрального ооцита, окруженного одним слоем фолликулярных клеток, которые стали кубовидными. Пеллюцидная зона - это тонкая полоса гликопротеинов, разделяющая ооцит и фолликулярные клетки. Белки на поверхности сперматозоидов связываются со специфическими гликопротеинами в пеллюцидной зоне.

Поздний первичный фолликул

Последняя стадия первичного фолликула достигается, когда фолликулярные клетки пролиферируют в многослойный эпителий, известный как гранулезная зона.Пеллюцидная зона увеличивается, и на этом изображении ее можно увидеть еще более отчетливо.

Вторичный фолликул

Характерной чертой, которая отличает вторичные фолликулы от первичных, является появление антрального отдела фолликула внутри слоя гранулезы. Антральный отдел содержит жидкость, богатую гиалуронаном и протеогликанами. Обратите внимание на увеличение клеточных слоев зоны гранулезы, более толстой зоны пеллюцида и большего ооцита. На этом этапе становится очевидным слой клеток вне фолликула.Эти клетки составляют внутреннюю теку и способствуют выработке эстрогенов.

Напомним, что для выработки эстрогена необходимы как клетки внутренней теки, так и клетки гранулезы. Эстрогены, как и все стероидные гормоны, производятся из холестерина в ходе многоступенчатого процесса, для которого требуется несколько различных ферментов. Ни клетки внутренней теки, ни клетки гранулезы не содержат всех ферментов, необходимых для преобразования холестерина в эстрогены. Клетки Theca содержат ферменты, которые катализируют первоначальное превращение холестерина в андрогены, но не имеют ароматазы, которая выполняет заключительные этапы преобразования андрогенов в эстрогены.Следовательно, андрогены, продуцируемые клетками теки, диффундируют в клетки гранулезы, которые содержат ароматазу, но не имеют ферментов для начальных этапов синтеза эстрогена. Тека-клетки находятся в лучшем положении, чтобы катализировать начальные этапы синтеза эстрогена, потому что они находятся ближе к кровеносным сосудам и могут поглощать ЛПНП для получения холестерина.

Графиан фолликул

Граафовый фолликул - это стадия после завершения первого деления мейоза, но до овуляции.Ооцит теперь является гаплоидом 2N. Фолликул характеризуется большим антральным отделом фолликула, который составляет большую часть фолликула. Вторичный ооцит, претерпевший первое мейотическое деление, расположен эксцентрично. Он окружен прозрачной оболочкой и слоем из нескольких клеток, известных как лучистая корона. При выходе из фолликула Граафа в яйцевод яйцеклетка будет состоять из трех структур: ооцита, блестящей оболочки и радиальной коронки.

Желтое тело

После выхода яйцеклетки оставшиеся клетки гранулезной и внутренней теки образуют желтое тело.В центре находятся остатки тромба, образовавшегося после овуляции. Вокруг сгустка находятся лютеиновые клетки гланулозы, а снаружи - лютеиновые клетки тека. Эти клетки производят прогестерон и, в меньшей степени, холестерин.

Клетки лютеина гранулезы имеют вид, характерный для стероид-продуцирующих клеток, с бледной цитоплазмой, указывающей на присутствие липидных капель. Клетки лютеина тека меньше по размеру и более глубоко окрашены. Кровеносные сосуды проникают в область лютеиновых клеток гранулезы, позволяя им поглощать холестерин, который используется для синтеза прогестерона.

Активность клеток желтого тела поддерживается лейтенизирующим гормоном. Если яйцеклетка оплодотворяется и имплантируется в стенку матки, хорионический гонадотропин человека заменяет лейтенизирующий гормон для поддержания активности клеток желтого тела.

Corpus Albicans

Если оплодотворение не происходит, клетки желтого тела остаются активными в течение примерно 14 дней до тех пор, пока уровень ЛГ не упадет, а желтое тело не развернется с образованием альбиканского тела.Секреторные клетки желтого тела дегенерируют, фагоцитируются макрофагами и замещаются фиброзным материалом.

Атретический фолликул

В каждом менструальном цикле несколько примордиальных фолликулов стимулируются для продолжения развития, но только один фолликул завершает развитие, чтобы освободить яйцеклетку. Другие фолликулы дегенерируют в результате процесса, называемого атрезией, который может произойти на любой стадии развития. Во время атрезии клетки гранулезы подвергаются апоптозу и замещаются волокнистым материалом.Ооцит дегенерирует, и основание, отделяющее ооцит от клеток гранулезы, утолщается и становится стекловидной мембраной.

.

границ | Идентификация новых микроРНК и характеристика профилей экспрессии микроРНК в фолликулярных клетках яичников рыбок данио

Введение

Развитие фолликулов и созревание ооцитов у позвоночных являются сложными событиями, которые требуют координации гормонов, происходящих из оси гипоталамус-гипофиз-гонад. Гипоталамус производит гонадотропин-рилизинг-гормон (GnRH), который стимулирует секрецию гонадотропинов, фолликулостимулирующего гормона (FSH) и лютеинизирующего гормона (LH) из гипофиза.У рыб ФСГ играет важную роль в развитии фолликулов, индуцируя выработку эстрадиола фолликулярными клетками яичников, в то время как ЛГ действует на фолликулярные клетки, индуцируя выработку 17α, 20β-дигидроксипрогестерона, известного как гормон, вызывающий созревание (MIH) (1 , 2). Затем MIH связывается с мембранными рецепторами прогестина (mPR), особенно с mPRα, экспрессируемыми на поверхности ооцитов (3, 4). Это, в свою очередь, активирует фактор промотора созревания (MPF), что приводит к высвобождению ооцита из его мейотического ареста и созреванию ооцита (5, 6).Кроме того, многие сигнальные молекулы, продуцируемые в фолликулярных клетках и / или ооцитах, также действуют локально, регулируя развитие фолликулов и созревание ооцитов (1, 2).

До того, как начать процесс созревания, фолликулы рыбок данио развиваются в три стадии. На стадии I или в фазе первичного роста ооциты начинают расти, и начинают формироваться фолликулы. Стадия II известна как кортикальная альвеола или превителлогенная стадия, при которой кортикальные альвеолы ​​накапливаются в ооцитах. III стадия характеризуется вителлогенезом (7).На этом этапе фолликулы не только увеличиваются в размерах, но и развивают способность к созреванию. Сообщалось, что маленькие ранние вителлогенные фолликулы неспособны подвергнуться созреванию при лечении хорионическим гонадотропином человека (ХГЧ, используемым как аналог ЛГ) или МИГ. Напротив, более крупные фолликулы в среднем и позднем вителлогенезе могут быть индуцированы этими гормонами и вступать в фазу созревания (7, 8). Следовательно, маленькие и средне-поздние вителлогенные фолликулы описываются как стадии III-1 (или IIIa) и III-2 (или IIIb) соответственно (8, 9).Сигнальные молекулы, продуцируемые внутри фолликулов, такие как члены суперсемейства трансформирующего фактора роста-β (TGF-β), как было показано, регулируют способность к созреванию (10–12).

MicroRNAs (miRNAs) составляют обширный класс небольших одноцепочечных некодирующих РНК длиной около 18 ~ 26 нуклеотидов (нуклеотидов) (13-15). В общем, miRNA сначала транскрибируются из интронной или межгенной ДНК в первичные miRNA, процессируются в miRNA-предшественники (pre-miRNA), а затем экспортируются в цитоплазму.Пре-миРНК имеют шпилечную структуру и далее процессируются в дуплексы зрелых миРНК, которые раскручиваются в одноцепочечные зрелые миРНК. В большинстве случаев зрелые miRNAs взаимодействуют с 3'-нетранслируемой областью целевых мРНК, чтобы снизить их стабильность и ингибировать трансляцию (15-17). Регулируя экспрессию генов, miRNAs участвуют во множестве онтогенетических и физиологических событий, включая репродукцию (18-20). miRNAs были обнаружены в яичниках многих видов, включая рыб (21-24).Сообщалось, что miRNA регулируют функции яичников у млекопитающих, такие как пролиферация гранулезных клеток (25) и апоптоз (26, 27), выработку эстрадиола (28, 29) и экспрессию прогестерона (30) и рецепторов LH / CG ( 31). Недавнее исследование продемонстрировало, что miRNA также являются важными регуляторами репродукции рыб (32). Однако функции miRNAs во время развития фолликулов рыб и созревания ооцитов все еще в значительной степени неизвестны.

Мы ранее обнаружили miR-17a и miR-430b в фолликулярных клетках рыбок данио и обнаружили, что уровни их экспрессии регулируются с помощью hCG (33), предполагая, что miRNA могут играть роль в созревании ооцитов.Чтобы дополнительно изучить, участвуют ли miRNAs в развитии фолликулов и созревании ооцитов, особенно в приобретении способности к созреванию, мы использовали секвенирование РНК следующего поколения (RNA-seq) для сравнения профилей экспрессии miRNA в фолликулярных клетках между фолликулами IIIa и IIIb стадий. Мы идентифицировали в значительной степени регулируемые miRNA, предсказали новые miRNA и подтвердили экспрессию четырех из значимо регулируемых miRNA. Наконец, посредством обогащения генов и анализа путей предсказанных генов-мишеней дифференциально экспрессируемых miRNAs мы определили ключевые пути, которые могут быть важны во время развития фолликулов и созревания ооцитов.

Материалы и методы

Животные

рыбок данио были приобретены у местного поставщика и содержались в 10-литровых резервуарах системы AHAB (Aquatic Habitats, FL) при температуре 28 ° C, при 14-часовом световом цикле и 10-часовом темном цикле. Рыб кормили дважды в день коммерческим кормом для тропических рыб. Протокол исследования был одобрен Комитетом по уходу за животными Йоркского университета. Все эксперименты проводились в соответствии с «Руководством по уходу и использованию экспериментальных животных» , опубликованным Канадским советом по уходу за животными.

Выделение фолликулярных клеток яичников

Самок рыбок данио анестезировали этиловым эфиром 3-аминобензойной кислоты (Sigma – Aldrich Canada Inc., Oakville, ON) и декапитировали. Яичники экстрагировали и поддерживали в культуральной чашке диаметром 100 мм, содержащей 60% среду Leibovitz L-15 без фенолового красного (Life Technologies, ThemoFisher Scientific, Burlington, ON). Фолликулы стадии IIIa (0,35–0,51 мм) и IIIb (0,52–0,65 мм) были вручную разделены и собраны в соответствии с их размером.Слои фолликулярных клеток собирали механически с помощью тонких щипцов.

Экстракция РНК и секвенирование малых РНК

Из каждой фолликулярной клетки стадии IIIa и IIIb были приготовлены по три образца, всего шесть образцов. Каждый образец содержал клетки, изолированные от 120 до 150 фолликулов, объединенных от 3 до 4 рыб. Общая РНК, обогащенная miRNA, экстрагировалась с использованием мини-набора miRNeasy (Qiagen, Germantown, MD) в соответствии с инструкциями производителя. Секвенирование малых РНК было выполнено Центром инноваций Génome Québec при Университете Макгилла с использованием платформы Illumina HiSeq 2500 Ultra-High-Throughput Sequencing.

необработанных считываний секвенирования были обработаны с использованием программы ACGT101-miR (LC Sciences, Хьюстон, Техас, США). Димеры адаптера, мусор, низкая сложность, обычные семейства РНК и повторы были удалены, и были сохранены только уникальные последовательности длиной 18–26 нуклеотидов. Затем уникальные чтения были сопоставлены с предшественниками рыбок данио, полученными из miRBase 22.0. Одно несоответствие в последовательности и вариация длины как на 3 ', так и на 5' концах допускались при выравнивании считываний с предшественниками рыбок данио с использованием поиска BLAST. Уникальные чтения, которые были сопоставлены с известными предшественниками, считались известными miRNA.Неаннотированные чтения, которые отображаются на противоположном плече известных пре-miRNA, считались известными miRNA, но обозначались либо p3, либо p5 в зависимости от того, были ли они отображены на 3 'или 5'-конце, соответственно. Остальные последовательности были сопоставлены с предшественниками других выбранных видов в miRBase 22.0 с помощью поиска BLAST и обозначены как консервативные новые miRNA. Некартированные последовательности подвергали BLAST-тестированию против версии генома CRCz11 рыбок данио, и с помощью RNAfold были предсказаны структуры РНК-шпильки, содержащие последовательности (34).Эти предсказанные miRNA были сочтены новыми. Следующие критерии были использованы для предсказания вторичной структуры пре-miRNAs: (1) количество нуклеотидов в одной выпуклости стебля было ≤ 12; (2) количество пар оснований в области стебля предсказанной шпильки было ≥16; (3) отсечка свободной энергии (кКал / моль) ≤ -15; (4) длина шпильки, верхних и нижних ножек и концевой петли была ≥50; 5) длина петли шпильки ≤ 20; (6) количество нуклеотидов в одной выпуклости в зрелой области было ≤ 8; (7) количество смещенных ошибок в одной выпуклости в зрелой области было ≤ 4; (8) количество смещенных выпуклостей в зрелой области было ≤ 2; (9) количество ошибок в зрелой области было ≤ 7; (10) количество пар оснований в зрелой области предсказанной шпильки было ≥12; и (11) процент зрелой области в стебле-петле был ≥80.Результаты были дополнительно уточнены, чтобы сохранить только miRNA, которые соответствуют следующим критериям: (1) каждая miRNA должна иметь по крайней мере одну предсказанную пре-miRNA, и такая pre-miRNA должна быть способна образовывать структуру шпильки, геномные координаты которой не должны перекрываться с известные пре-миРНК, включенные в этот анализ; (2) miRNA с точной последовательностью и совпадением количества, но с разными предсказанными пре-miRNA, подсчитывались только один раз; и (3) сохраненные miRNA должны иметь по крайней мере 100 отсчетов во всех повторностях образцов из наборов образцов IIIa или IIIb.

Анализ дифференциальных выражений, прогнозирование целей и анализ обогащения

счетчиков секвенирования сначала нормализовали параметром размера библиотеки соответствующего образца. Дифференциальная экспрессия miRNA на основе нормализованных подсчетов секвенирования была проанализирована с помощью теста Стьюдента t ( p ≤ 0,05) и визуализирована с помощью Heatmapper (35). Потенциальные мишени для значительно активируемых или подавляемых miRNAs были предсказаны путем перекрывания данных предсказания двух вычислительных алгоритмов предсказания мишеней: TargetScan (36) и miRanda 3.3а (37). Аннотации генной онтологии (GO) и анализ обогащения сигналов Киотской энциклопедии генов и геномов (KEGG) были выполнены с использованием набора инструментов ClueGO (38). Термины GO и пути KEGG, которые имеют значение p ≤0,05, считались значимыми.

ПЦР в реальном времени

miRNA экстрагировали, как описано выше. Извлеченную miRNA полиаденилировали и обратно транскрибировали в кДНК с использованием набора NCode miRNA First-Strand Synthesis Kit (Life Technologies) в соответствии с инструкциями производителя.ПЦР в реальном времени (qPCR) выполняли с использованием универсального обратного праймера NCode вместе с прямым miRNA-специфическим праймером (таблица 1) и мастер-миксом EvaGreen qPCR в соответствии с протоколом, предложенным производителем. Относительные уровни миРНК определяли с использованием метода ΔΔ C t после нормализации до уровня эндогенного U6.

Таблица 1 . Список праймеров, используемых в ПЦР в реальном времени.

Статистический анализ

Тест

Стьюдента t использовали для сравнения уровней миРНК между стадией IIIa и стадией IIIb с использованием GraphPad Prism.

Результаты

Характеристика miRNA в фолликулярных клетках яичников рыбок данио

Шесть библиотек кДНК были приготовлены из микроРНК, выделенных из трех пулов фолликулярных клеток стадии IIIa и трех пулов фолликулярных клеток стадии IIIb (Фигуры 1A, B). Впоследствии для определения профилей экспрессии микроРНК в этих образцах использовалась технология TruSeq Massively Parallel Sequencing компании Illumina. После удаления считываний низкого качества количество отображаемых считываний в ячейках стадии IIIa и стадии IIIb составило 31601023 и 40205729 соответственно.Картирование считывания секвенирования miRNA рыбок данио из miRBase 22.0 выявило присутствие 214 известных miRNA. Они включали 200 аннотированных miRNA (Таблица S1), а также 9 miRNA, происходящих из 3'-плеча, и 5 miRNA, происходящих из 5'-плеча известных pre-miRNAs (Table S2). Некартированные считывания затем сравнивали со зрелыми последовательностями miRNA от других видов, и определяли их геномные положения в геноме рыбок данио, в результате чего была идентифицирована 31 консервативная новая miRNA (Таблица S3). Оставшиеся неотмеченные считывания были дополнительно картированы в геном рыбок данио, и 44 новые miRNAs с предсказанными miRNA-предшественниками были идентифицированы в фолликулярных клетках яичников рыбок данио (Таблица S4).

Рисунок 1 . Обзор данных малых последовательностей РНК в фолликулярных клетках, выделенных из фолликулов III стадии. (A) Изображение вителлогенных фолликулов стадии IIIa и стадии IIIb. (B) Изображение фолликула стадии IIIa до и после выделения фолликулярных клеток. (C) Распределение популяций РНК в фолликулярных клетках стадии IIIa и IIIb. (D) Считывание распределения длины набора данных small RNA-seq. (E) Относительное количество 10 наиболее высоко экспрессируемых miRNA.

По сравнению с другими популяциями РНК (т. Е. МРНК, рРНК, мяРНК, тРНК, мяРНК и другие разные РНК) на количество микроРНК приходилось 66,16 и 70,40% считываний секвенирования в фолликулярных клетках IIIa и IIIb соответственно (рис. 1С). Большинство обнаруженных отображаемых считываний miRNA находились в диапазоне от 21 до 26 нуклеотидов, при этом большинство считываний miRNA имели длину 22 нуклеотида (рис. 1D). Кроме того, в первую десятку обнаруженных микроРНК входят miR-202-5p, miR-143, miR-22a-3p, miR-92a-3p, miR-26a-5p, miR-181a-5p, miR-21, miR- 30d, miR-27c-3p и miR-27b-3p.Они составляли 72,64% от числа картированных miRNA (рис. 1E) и были экспрессированы в фолликулярных клетках яичников на стадиях IIIa и IIIb.

Дифференциальная экспрессия miRNA в фолликулярных клетках стадии IIIa и стадии IIIb

Из 289 miRNAs, обнаруженных в фолликулярных клетках, 24 дифференциально экспрессировались между стадиями IIIa и IIIb, из которых 8 были значительно повышены, а 8 были значительно понижены, более чем в 2 раза, соответственно (рис. 2A). Если не было применено ограничение на изменение кратности, было обнаружено, что 9 аннотированных и 2 консервативных новых miRNA активировались, в то время как 12 аннотированных и 1 новая miRNA были подавлены в клетках стадии IIIb по сравнению с таковыми на стадии IIIa (рисунки 2Б, В).

Рисунок 2 . Дифференциальная экспрессия 24 miRNA в фолликулярных клетках стадии IIIa и IIIb. (A) Вулкан график miRNA, экспрессируемых в фолликулярных клетках стадии IIIb по сравнению с стадией IIIa. Вертикальные линии указывают на кратное изменение <1/2 и> 2, а горизонтальная линия представляет порог значимого изменения ( p ≤ 0,05). (B) Относительное среднее значение экспрессии miRNA (log 2 -кратное изменение) в фолликулярных клетках стадии IIIb по сравнению с клетками стадии IIIa (значение P ≤0.05). (C) Тепловая карта дифференциально экспрессируемых miRNA между фолликулярными клетками стадии IIIa и IIIb.

Четыре из дифференциально экспрессируемых miRNA, идентифицированных с помощью RNA-seq, dre-miR-22a-3p, dre-miR-16a, dre-miR-181a-3p и dre-miR-29a, были подтверждены с помощью qPCR. Были приготовлены новые наборы образцов из фолликулов стадии IIIa и IIIb, и была проведена количественная ПЦР. Хотя тенденция между результатами секвенирования (рис. 3A) и анализов qPCR (рис. 3B) была аналогичной, эксперименты qPCR показали более значительные и / или более сильные изменения в этих уровнях miRNA между двумя группами образцов.

Рисунок 3 . Подтверждение наличия нескольких miRNA, дифференциально экспрессируемых в фолликулярных клетках на стадии IIIa и IIIb. (A) Уровни экспрессии miRNA dre-miR-22a-3p, dre-miR-29a, dre-miR-181a-3p и dre-miR-16a, обнаруженные с помощью небольшой последовательности RNA-seq. (B) Относительные уровни экспрессии тех же микроРНК, измеренные с помощью ПЦР в реальном времени. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего ( n = 3). * P ≤ 0,05; ** P <0,01; *** П <0.001 по результатам анализа Стьюдента t -тест.

Прогнозирование генов-мишеней и анализ путей

Чтобы получить некоторое представление о биологических функциях и сигнальных путях, регулируемых miRNAs, которые показали значительные изменения между фолликулярными клетками IIIa и IIIb, мы выполнили анализ обогащения GO и KEGG на предполагаемых мишенях этих miRNAs. Большинство биологических процессов, регулируемых дифференциально экспрессируемыми miRNAs, были связаны с развитием (рис. 4).Интересно, что активность трансмембранного рецептора, активность сигнального рецептора и активность рецептора, связанного с G-белком, также были среди наиболее значительно обогащенных терминов GO (рис. 5). Анализ пути KEGG выявил несколько ключевых путей, которые были обогащены предполагаемыми мишенями miRNA, которые дифференциально экспрессировались между клетками стадии IIIa и IIIb. В частности, сигнальные пути MAPK, эндоцитоз, регуляция актинового цитоскелета, передача сигналов FoxO, передача сигналов инсулина, передача сигналов AGE-RAGE, передача сигналов TGF-β и сигнальные пути p53 были значительно обогащены прогнозируемыми мишенями miRNA, которые были как вверх, так и вниз. регулируется в фолликулярных клетках стадии IIIb.Однако клеточный цикл, инфекция простого герпеса, инфекция сальмонеллы, передача сигналов фосфатидилинозитола, взаимодействие ECM-рецепторов и пути эксцизионной репарации оснований были обогащены только генами, потенциально регулируемыми miRNAs, активируемыми в фолликулярных клетках стадии IIIb (рис. 4A). С другой стороны, фокальная адгезия, апоптоз, передача сигналов mTOR, передача сигналов ErbB, опосредованное прогестероном созревание ооцитов и пути передачи сигналов VEGF были значительно обогащены предполагаемыми мишенями miRNAs, подавляемых на стадии IIIb.Исследование генов, связанных с этими путями KEGG (таблица S5), показало, что некоторые из генов были перечислены в нескольких путях. Например, несколько генов, связанных с путем MAPK, также были связаны с FoxO, сигнальным путем AGE-RAGE при диабетических осложнениях и путем заражения сальмонеллой. Для путей, которые были обогащены генами-мишенями как повышающих, так и понижающих регулируемых miRNAs, были специфические гены, которые, как было обнаружено, были нацелены только на повышающие или понижающие регулируемые miRNAs.Примечательно, что среди пути TGF-β, ndr1 был нацелен на miRNA, подавляемую в фолликулярных клетках на стадии IIIb, тогда как tgfb1a, tgfb1b и tgfb2 были обнаружены только в списке генов, нацеленных на miRNA, которые были активированы на стадии IIIb (Таблица S5. ). Для пути MAPK несколько лигандов и рецепторов факторов роста фибробластов (fgf), а именно fgf13a, fgf3, fgf4 и fgfr2, были нацелены только на miRNAs, подавляемые в клетках стадии IIIb (Таблица S5).

Рисунок 4 . Анализ генной онтологии (GO) прогнозируемых мишеней miRNA, которые дифференциально экспрессировались между фолликулярными клетками стадии IIIa и стадии IIIb.Анализ обогащения GO был выполнен с использованием ClueGO на предполагаемых генах-мишенях как активируемых (A) , так и подавленных (B) miRNA. Ось X представляет количество генов-мишеней, а ось Y показывает термины, относящиеся к биологическим процессам, молекулярным функциям или клеточным компонентам.

Рисунок 5 . Киотская энциклопедия генов и геномов (KEGG) анализ пути обогащения генов, на которые, по прогнозам, нацелены активированные (A) и подавленные (B) миРНК в фолликулярных клетках стадии IIIb.Анализ KEGG был выполнен с использованием ClueGO. Ось абсцисс представляет количество генов-мишеней, а ось ординат обозначает категорию обогащенного пути.

Чтобы определить, могут ли miRNA, дифференциально экспрессируемые между фолликулярными клетками на стадиях IIIa и IIIb, играть роль в созревании ооцитов, мы дополнительно проанализировали три ключевых гена, которые, как известно, играют критическую роль в созревании ооцитов, lhcgr (кодирует рецептор LH) , paqr7b (кодирует mPRα) и pgrmc1 (кодирует компонент 1 мембраны рецептора прогестерона).Среди них мРНК pgrmc1 была предсказанной мишенью для miR-451 и miR-144-3p, обе подавлялись более чем на 80% в клетках стадии IIIb. Хотя разница в уровнях miR-144-3p между двумя стадиями не была статистически значимой ( p = 0,095), она была включена в этот анализ из-за степени его подавления. С другой стороны, было предсказано, что lhcgr и paqr7b нацелены на miRNAs, которые активируются или подавляются в клетках стадии IIIb. Однако большинство активированных miRNAs присутствует на гораздо более низких уровнях (Table 2).

Таблица 2 . Дифференциально экспрессируемые miRNA, которые, как предполагается, нацелены на ключевые гены при созревании ооцитов.

Обсуждение

Роль miRNAs в воспроизводстве рыб до сих пор в значительной степени неизвестна. Используя анализ РНК-seq, мы охарактеризовали миРНК, экспрессируемые в фолликулярных клетках, выделенных из фолликулов яичников на стадии вителлогенеза. Это привело к предсказанию 31 консервативной новой и 44 новых miRNA, что расширило наши знания о miRNA у рыбок данио.Кроме того, мы идентифицировали miRNA, которые по-разному экспрессировались между фолликулярными клетками стадии IIIa, которые неспособны к созреванию, и фолликулярными клетками стадии IIIb, которые могут реагировать на гормональные сигналы, вызывающие созревание ооцитов. Анализ предсказанных генов-мишеней дифференциально экспрессируемых miRNAs дополнительно подтверждает участие нескольких ключевых путей в регуляции роста фолликулов и созревания ооцитов и выявляет новые пути, которые могут быть исследованы в будущих исследованиях.

Самой распространенной miRNA, экспрессируемой в фолликулярных клетках вителлогенных фолликулов, была miR-202-5p, составляющая примерно 18% от общего количества miRNA.Было показано, что эта миРНК преимущественно экспрессируется в гонадах различных позвоночных, включая рыб (24, 32, 39, 40). Высокая экспрессия этой miRNA предполагает, что она является важным регулятором развития и функции яичников у позвоночных. У рыбок данио уровни miR-202-5p в фолликулах стадии II (пре-вителлогенез) были сильно повышены по сравнению с фолликулами стадии I (первичный рост) (24). Результаты этого исследования показывают, что этот высокий уровень экспрессии сохраняется на стадии III, во время роста фолликулов и при подготовке к созреванию ооцитов.Таким образом, весьма вероятно, что miR-202-5p играет важную роль в развитии фолликулов рыбок данио и созревании ооцитов. Действительно, недавнее исследование, проведенное в medaka, предоставляет убедительные доказательства в поддержку критической роли mir-202 в оогенезе / фолликулогенезе. Нокаут mir-202 привел к нарушению раннего развития фолликулов и сильно уменьшил количество продуцируемых яиц (32). У человека уровни miR-202-5p в фолликулярной жидкости положительно коррелируют с потенциалом оплодотворения ооцитов (41), предполагая роль miR-202-5p в правильном развитии ооцитов.Более того, miR-202-5p, как было показано, регулирует передачу сигналов PI3K (42) и TGF-β, оба из которых играют важную роль в фолликулогенезе и созревании ооцитов (43, 44).

Двумя другими наиболее распространенными miRNA, идентифицированными в нашем исследовании, были miR-143 и miR-22a-3p. Сообщалось также, что эти miRNAs высоко экспрессируются в яичниках млекопитающих (45) и рыб (46–48). О роли этих miRNA в воспроизводстве рыб не сообщалось. Однако несколько исследований на млекопитающих показывают, что они регулируют развитие фолликулов.Например, сообщалось, что miR-143 ингибирует образование примордиальных фолликулов мыши, подавляя экспрессию генов клеточного цикла и подавляя пролиферацию клеток прегранулезы (49). miR-143 также нацелен на FSHR , ген, кодирующий рецептор FSH (50), и подавляет пролиферацию гранулезных клеток и продукцию эстрадиола (51). Экспрессия miR-143 ингибируется ФСГ (51) и TGF-β (50). Было обнаружено, что hsa-miR-22-3p, гомолог dre-miR-22a-3p, значительно подавляется в плазме пациентов с преждевременной недостаточностью яичников (52), что позволяет предположить потенциальную роль этой miRNA в поддержании надлежащего развитие фолликула.Функция и регуляция miR-143 и miR-22a-3p во время развития фолликулов рыбок данио будут изучены в будущем.

В этом исследовании мы идентифицировали 24 miRNAs, которые были активированы или подавлены в фолликулярных клетках стадии IIIb по сравнению с фолликулярными клетками фолликулов стадии IIIa. Поскольку фолликулы на стадии IIIa неспособны к созреванию, тогда как стадия IIIb способна реагировать на гормональные сигналы и подвергаться созреванию (2), miRNAs, которые по-разному экспрессируются на этих двух стадиях, вероятно, участвуют в регуляции способности этих фолликулов к созреванию.Поэтому мы исследовали 3 гена, которые играют критическую роль в LH- и MIH-индуцированном созревании ооцитов, чтобы определить, могут ли они регулироваться miRNAs, дифференциально экспрессируемыми в клетках стадии IIIa и IIIb. Интересно, что мы обнаружили, что две miRNAs, которые, по прогнозам, нацелены на pgrmc1 , нокаут или ингибирование которых нарушает MIH-индуцированное созревание ооцитов (53, 54), сильно подавляются в клетках стадии IIIb. Сообщалось, что ооциты из фолликулов размером от 0,55 до 0,65 мм, которые похожи на фолликулы стадии IIIb, используемые в нашем исследовании, имели гораздо более высокие уровни белка pgrmc1, чем ооциты на более ранних стадиях вителлогении (55).Поскольку miRNA могут секретироваться и оказывать паракринные / эндокринные регуляторные эффекты на другие клетки (15), возможно, что уменьшение этих двух miRNA способствует более высокому уровню белка pgrmc1, наблюдаемому в ооцитах на этой стадии. Предполагается, что несколько других дифференциально экспрессируемых miRNA нацелены на гены, кодирующие рецептор LH и mPRα, которые опосредуют индуцирующие созревание эффекты LH и MIH, соответственно (53, 56, 57). Хотя lhcgr и paqr7b являются предполагаемыми мишенями как для активируемых, так и для подавляемых miRNA, было отмечено, что три из активируемых miRNA, которые, как предполагается, нацелены на lhcgr или paqr7b, имеют очень низкие уровни и, следовательно, могут не играть важную роль в регуляции экспрессии. этих генов.Будущие исследования будут изучать, нацелены ли и как эти miRNAs на гены, участвующие в передаче сигналов LH и MIH, чтобы регулировать способность к созреванию у рыбок данио.

Анализ пути показал, что несколько ключевых путей, которые, как известно, важны для регуляции созревания ооцитов, являются одними из предполагаемых мишеней miRNAs, подавляемых на стадии IIIb. К ним относятся опосредованное прогестероном созревание ооцитов, пути передачи сигналов ErbB, mTOR и VEGF. У рыб хорошо задокументировано, что фолликулярные клетки продуцируют 17α, 20β-дигидроксипрогестерон, который действует на мембранные рецепторы прогестина, вызывая созревание ооцитов (3).Роль ErbB в созревании ооцитов также описана у рыбок данио (53). Недавнее исследование показало, что лечение рапамицином, ингибитором mTOR, предотвращает развитие средних и поздних вителлогенных фолликулов (58), предполагая, что этот путь важен для стимулирования роста фолликулов от стадии IIIa до стадии IIIb. Было показано, что путь mTOR способствует росту фолликулов (59), а также может участвовать в созревании ооцитов (60) у млекопитающих. Сообщалось, что VEGF усиливает эффект ФСГ на продвижение пролиферации гранулезных клеток (61) и ингибирует апоптоз гранулезных клеток яичников (62), что позволяет предположить, что он играет роль в стимулировании роста фолликулов у млекопитающих.Регулирует ли и каким образом путь VEGF развитие фолликулов рыб, требуется дальнейшее изучение.

Одним из наиболее высокообогащенных путей, нацеленных на miRNAs, дифференциально экспрессируемых между фолликулярными клетками на стадиях IIIa и IIIb, был путь передачи сигналов MAPK. Этот путь хорошо изучен у позвоночных и, как было показано, регулирует развитие фолликулов и созревание ооцитов (63–67). Предполагается, что у рыб путь MAPK опосредует действия различных гормонов и факторов роста в яичниках, такие как регуляция продукции стероидов (68, 69) и экспрессии субъединиц активина / ингибина (70), а также созревание ооцитов ( 53, 71).Интересно, что анализ транскриптомов яичников рыбок данио показал, что путь MAPK также сильно регулируется при переходе фолликулов со стадии I на стадию II (72) и наиболее сильно зависит от антибиотиков β-дикетона, которые обладают токсическим действием на репродуктивную систему (73). В этом исследовании мы обнаружили, что этот путь может быть мишенью для miRNAs, которые могут либо активироваться, либо подавляться в клетках стадии IIIb. Однако некоторые из генов-мишеней, такие как несколько fgfs и их рецепторы, были обнаружены только в генах, на которые могут быть нацелены miRNAs, подавляемые в клетках стадии IIIb.Хотя роль этих fgfs в яичнике рыб неизвестна, сообщалось, что некоторые родственные лиганды FGF способствуют созреванию ооцитов у млекопитающих (74, 75). Вместе эти находки убедительно подтверждают, что путь MAPK играет центральную роль в развитии фолликулов яичников и созревании ооцитов, и его активность динамически регулируется miRNAs.

Многие исследования показали, что лиганды, рецепторы и нижестоящие сигнальные молекулы суперсемейства TGF-β экспрессируются в яичнике рыбок данио (76, 77) и что этот путь участвует в раннем развитии фолликулов, росте фолликулов и созревании ооцитов у рыбок данио. (10, 70, 78–80).Среди членов семейства TGF-β активин оказывает сильное влияние на повышение компетентности в отношении созревания и созревание ооцитов (8, 10), в то время как TGF-β1 ингибирует созревание ооцитов (43, 78, 81). Было высказано предположение, что несколько костных морфогенетических белков (BMP), таких как BMP-15 (11, 82), BMP2b и BMP4 (83), ингибируют преждевременное созревание ооцитов. В соответствии с ингибирующей ролью TGF-β1 в созревании ооцитов, мы обнаружили, что tgfb1a, tgfb1b и tgfb2 были среди мишеней miRNAs, активируемых в фолликулярных клетках стадии IIIb.Однако было предсказано, что рецепторы активина типа I и типа II (т.е. acvr1ba и acvr2aa) нацелены как на повышающую, так и на понижающую регуляцию miRNA в фолликулярных клетках стадии IIIb. Smad1 и smad5, которые обеспечивают передачу сигналов с помощью BMPs, регулируются miRNAs с понижающей и повышающей регуляцией, соответственно, в фолликулярных клетках стадии IIIb. Эти находки подтверждают, что активины и BMP строго регулируются miRNAs во время вителлогенеза. Возможно, что разные лиганды, передающие сигналы через эти рецепторы и / или smads, по-разному влияют на регуляцию роста фолликулов и / или созревания ооцитов.

В заключение, наше исследование характеризует профили экспрессии miRNA в фолликулярных клетках вителлогенных фолликулов рыбок данио. Мы определили количество miRNA, предсказали новые miRNA и идентифицировали miRNA, дифференциально экспрессируемые между фолликулярными клетками стадии IIIa и IIIb. Комплексный анализ генной онтологии и обогащения путей предсказанных мишеней значительно регулируемых miRNAs выявил несколько сигнальных путей, которые могут иметь решающее значение для развития фолликулов и созревания ооцитов.Необходимы дальнейшие исследования, чтобы определить, как эти пути регулируются miRNA и как они участвуют в функциях яичников.

Доступность данных

Наборы данных, созданные в этом исследовании, можно найти в GEO (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE131759).

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Комитетом по уходу за животными Йоркского университета.

Соглашение об именах

miRNA

Полностью новые miRNA, идентифицированные в этом исследовании, обозначены префиксом PC-.Консервативные новые miRNA обозначены названием вида, у которого новая miRNA рыбок данио имеет наибольшее сходство. Недавно идентифицированные miRNA, которые картированы с известной пре-miRNA рыбок данио, предварительно получили название p3 или p5, в зависимости от того, происходят ли они от 3 'или 5' конца петли стебля пре-miRNA. Именование этих вновь идентифицированных miRNA было передано в miRbase, и их имена будут окончательно утверждены после утверждения miRBase.

Авторские взносы

YZ и XQ разработали и провели эксперименты.YZ проанализировал данные и подготовил рукопись. CP контролировал исследование и участвовал в разработке экспериментов, анализе данных и написании рукописей. Все авторы одобрили отправку рукописи.

Финансирование

Эта работа была поддержана грантом на открытие от Совета по естественным и инженерным исследованиям для CP.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Мы благодарим г-жу Джанет Флейтес Медина за ее помощь в уходе за рыбками данио и г-жу Ребекку Хаф за критическую рецензию рукописи.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fendo.2019.00518/full#supplementary-material

Список литературы

3. Hanna RN, Zhu Y. Контроль мейотической передачи сигналов с помощью мембранного или ядерного рецептора прогестина в ооцитах рыбок данио, заключенных в фолликулы. Mol Cell Endocrinol. (2011) 337: 80–8. DOI: 10.1016 / j.mce.2011.02.004

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

4. Томас П. Роль рецептора эстрогена, связанного с G-белком (GPER / GPR30), в поддержании ареста мейоза в ооцитах рыб. J Стероид Biochem Mol Biol. (2017) 167: 153–61. DOI: 10.1016 / j.jsbmb.2016.12.005

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

5. Нагахама Ю., Йошикуни М., Ямасита М., Токумото Т., Кацу Ю.Регуляция роста и созревания ооцитов у рыб. Curr Top Dev Biol. (1995) 30: 103–45. DOI: 10.1016 / S0070-2153 (08) 60565-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

6. Патино Р., Йошизаки Г., Томас П., Кагава Х. Гонадотропный контроль созревания фолликулов яичников: двухэтапная концепция и ее механизмы. Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. (2001) 129: 427–39. DOI: 10.1016 / S1096-4959 (01) 00344-X

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

8.Ву Т., Патель Х, Мукаи С., Мелино С., Гарг Р., Ни Х и др. Активин, ингибин и фоллистатин в яичниках рыбок данио: экспрессия и роль в созревании ооцитов. Biol Reprod. (2000) 62: 1585–92. DOI: 10.1095 / biolreprod62.6.1585

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

9. Gioacchini G, Giorgini E, Merrifield DL, Hardiman G, Borini A, Vaccari L, et al. Пробиотики могут стимулировать созревание фолликулов: случай Danio rerio . Biol Reprod. (2012) 86:65. DOI: 10.1095 / биолрепрод.111.094243

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

10. Pang Y, Ge W. гонадотропин и активин повышают способность к созреванию ооцитов у рыбок данио ( Danio rerio ) 1. Biol Reprod. (2002) 66: 259–65. DOI: 10.1095 / biolreprod66.2.259

CrossRef Полный текст | Google Scholar

11. Clelland ES, Tan Q, Balofsky A, Lacivita R, Peng C. Ингибирование преждевременного созревания ооцитов: роль костного морфогенетического белка 15 в фолликулах яичников рыбок данио. Эндокринология. (2007) 148: 5451–8. DOI: 10.1210 / en.2007-0674

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

12. Peng C, Clelland E, Tan Q. Возможная роль костного морфогенетического протеина-15 в развитии фолликулов рыбок данио и созревании ооцитов. Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol. (2009) 153: 83–7. DOI: 10.1016 / j.cbpa.2008.09.034

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

17. Винтер Дж., Юнг С., Келлер С., Грегори Р.И., Дидерикс С.Многие пути к зрелости: пути биогенеза микроРНК и их регуляция. Nat Cell Biol. (2009) 11: 228–34. DOI: 10.1038 / ncb0309-228

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

22. Juanchich A, Le Cam A, Montfort J, Guiguen Y, Bobe J. Идентификация дифференциально экспрессируемых miRNA и их потенциальных мишеней во время развития яичников рыб. Biol Reprod. (2013) 88: 128. DOI: 10.1095 / биолрепрод.112.105361

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

23.Desvignes T, Beam MJ, Batzel P, Sydes J, Postlethwait JH. Расширение аннотации микроРНК рыбок данио на основе секвенирования малых РНК. Gene. (2014) 546: 386–9. DOI: 10.1016 / j.gene.2014.05.036

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

24. Вонг QW-L, Ге В., Сан М.-А, Чжоу С., Лау С.-З., Чжун С. и др. Идентификация и характеристика специфической сигнатуры экспрессии 13-miRNA во время активации фолликула в яичнике рыбок данио †. Biol Reprod. (2017) 98: 42–53. DOI: 10.1093 / biolre / iox160

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

25. Ян Г, Чжан Л., Фанг Т., Чжан Ц., Ву С., Цзян Ю. и др. МикроРНК-145 подавляет пролиферацию клеток гранулезы мыши, воздействуя на рецептор активина IB. FEBS Lett. (2012) 586: 3263–70. DOI: 10.1016 / j.febslet.2012.06.048

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст |

.

Данные взяты из: Транскриптомы фолликулярных и лютеиновых клеток яичников крупного рогатого скота

Авторы
Рецензирование
Предполагаемое использование

Данные фолликулярных транскриптомов GC и TC можно сравнить с ранее опубликованными анализами экспрессии генов крупного рогатого скота для подтверждения и являются ценными при анализе метаданных, исследующих транскриптомы GC и TC на разных этапах или у разных видов. Нет ранее опубликованных транскриптомов, доступных для больших лютеиновых клеток (LLC) и малых лютеиновых клеток (SLC).Таким образом, данные об экспрессии генов лютеиновых клеток позволяют по-новому взглянуть на эти два типа клеток. Списки идентифицированных генов, которые специфически обогащены каждым типом соматических клеток яичников, могут дать информацию для будущих физиологических исследований функций соматических клеток яичников.

Источники финансирования

Министерство сельского хозяйства США

Министерство сельского хозяйства США

Министерство сельского хозяйства США

Национальный институт продовольствия и сельского хозяйства

U.S. Департамент сельского хозяйства

Министерство сельского хозяйства США

Основная статья

Ромерейм, С. М., Саммерс, А. Ф., Польмайер, В. Э., Чжан, П., Хоу, Х., Тэлботт, Х. А., Кушман, Р. А., Вуд, Дж. Р., Дэвис, Дж. С., и Купп, А. С. (2017). Транскриптомы фолликулярных и лютеиновых клеток яичников крупного рогатого скота. Краткие данные , 10 , 335-339. https://doi.org/10.1016/j.dib.2016.11.093

Статьи по теме
Ссылка на метод

Romereim, S.М., Саммерс, А. Ф., Польмайер, В. Э., Чжан, П., Хоу, Х, Тэлботт, Х. А., Кушман, Р. А., Вуд, Дж. Р., Дэвис, Дж. С., и Купп, А. С. (2017). Транскриптомы фолликулярных и лютеиновых клеток яичников крупного рогатого скота. Краткие данные , 10 , 335-339. https://doi.org/10.1016/j.dib.2016.11.093

Dataset DOI (цифровой идентификатор объекта)

10.1016 / j.dib.2016.11.093

Тип продукта
Предпочтительное цитирование набора данных

Romereim, S.М., Саммерс, А. Ф., Полмайер, В. Э., Чжан, П., Хоу, Х, Тэлботт, Х. А., Кушман, Р. А., Вуд, Дж. С., Дэвис, Дж. С., и Купп, А. С. (2017). Транскриптомы фолликулярных и лютеиновых клеток яичников крупного рогатого скота. Краткие данные 10: 335-339. https://doi.org/10.1016/j.dib.2016.11.093

.

Менструальный цикл. Модель 1: фолликулярные клетки яичникового цикла

1. КОЛИЧЕСТВО НАЛИЧИЯ ФСГ

Менструальный цикл Название Дата Период ПРЕ-ЛАБОРАТОРИЯ 1. Запишите три известных вам факта о менструальном цикле. A. B. C. ОСОБЕННАЯ ФАЗА Внутри яичников находится много яйцеклеток.Каждое яйцо вложено

Дополнительная информация

Эндокринная система

Основы анатомии и физиологии человека Элейн Н. Мариеб Седьмое издание Глава 9 Слайды эндокринной системы 9.1 9.48 Слайды лекций в PowerPoint Джерри Л. Кука Эндокринная система Второй мессенджер

Дополнительная информация

Аномальное маточное кровотечение

Аномальное маточное кровотечение УХОД ЗА ЖЕНЩИНАМИ Здоровая женщина - сильная женщина (407) 898-1500 Аномальное маточное кровотечение - одна из самых частых причин, по которой женщины обращаются к врачу.Это может произойти в любом возрасте и имеет

Дополнительная информация

СИНХРОНИЗАЦИЯ СКОТА

ПОД ЭСТРУСНОЙ СИНХРОНИЗАЦИЕЙ СКОТА FS921C Робин Салверсон, преподаватель по домашнему животноводству, округ Хардинг, и Джордж Перри, специалист по разведению и выращиванию говядины Нарушение репродуктивной функции

Дополнительная информация

Лекарства, вызывающие овуляцию

АМЕРИКАНСКОЕ ОБЩЕСТВО РЕПРОДУКТИВНОЙ МЕДИЦИНЫ Лекарства для индукции овуляции Руководство для пациентов ИНФОРМАЦИОННАЯ СЕРИЯ ДЛЯ ПАЦИЕНТОВ Опубликовано Американским обществом репродуктивной медицины под руководством

Дополнительная информация

СИНДРОМ ПОЛИКИСТОЗА ЯИЧНИКОВ

Информационный буклет «ПОЛИКИСТИЧЕСКИЙ СИНДРОМ ЯИЧНИКОВ» Ваше здоровье.Наш приоритет. Страница 2 из 6 Что такое синдром поликистозных яичников? (СПКЯ) Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) - наиболее частое гормональное нарушение у женщин

Дополнительная информация

Как действуют препараты от бесплодия?

Как действуют препараты от бесплодия? В нормальных условиях овуляция происходит один раз в месяц, когда созревшая яйцеклетка, готовая к оплодотворению, выходит из яичников. Для пар, пытающихся зачать ребенка,

Дополнительная информация

Кисты яичников у молочного скота

AS-451-W Пересмотрено в 2001 году. Совместная служба поддержки Университета Пердью, Западный Лафайет, IN 47907 Кисты яичников у молочного скота R.Д. Аллрих, Департамент зоотехники Университета Пердью, Западный Лафайет,

Дополнительная информация

Искусственное оплодотворение

Искусственное оплодотворение Что здесь подразумевается? Искусственное оплодотворение - это метод вспомогательной репродукции, который заключается во введении обработанных в лаборатории сперматозоидов в матку или цервикальный канал женщины.

Дополнительная информация

Понимание фертильности

Понимание фертильности 6 Введение Слово плодородный означает способность забеременеть или вызвать беременность.Базовые знания о мужской и женской репродуктивной системе важны для понимания

Дополнительная информация

Синдром поликистоза яичников

Синдром поликистозных яичников Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) - это заболевание, которым страдают от 5 до 10% женщин. СПКЯ имеет три ключевых особенности: 1) высокий уровень гормонов, называемых андрогенами; 2) нерегулярные менструации

Дополнительная информация

Синдром поликистозных яичников (СПКЯ)

UW МЕДИЦИНА ОБРАЗОВАНИЕ ПАЦИЕНТОВ Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) Признаки, симптомы и лечение Что такое СПКЯ? Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) - это заболевание, которым страдает до 1 из 10 женщин репродуктивного возраста

. Дополнительная информация

Бесплодие: обзор

АМЕРИКАНСКОЕ ОБЩЕСТВО РЕПРОДУКТИВНОЙ МЕДИЦИНЫ Бесплодие: Обзор Руководство для пациентов ИНФОРМАЦИОННАЯ СЕРИЯ ДЛЯ ПАЦИЕНТОВ Опубликовано Американским обществом репродуктивной медицины под руководством

Дополнительная информация

Справочник по экстракорпоральному оплодотворению

Справочник по экстракорпоральному оплодотворению Уильям Ф.Зиглер, Д.О. Медицинский директор Скотт Кратка, ELD, TS Директор лаборатории эмбриологии Лорен Ф. Лукас, P.A.-C, M.S. Ассистент врача Фрэнсис Черняк, Р.Н.

Дополнительная информация

КАК ОЦЕНИВАЕТСЯ ЗАПАС ЯИЧНИКОВ?

КАК ОЦЕНИВАЕТСЯ ЗАПАС ЯИЧНИКОВ? Большинство показателей, которые мы должны оценивать, ИЛИ оценивают количество яиц, а не качество яиц, и эти два показателя не всегда идут рука об руку. Ни один индивидуальный тест не является идеальным

Дополнительная информация

Лекарства, вызывающие овуляцию

АМЕРИКАНСКОЕ ОБЩЕСТВО РЕПРОДУКТИВНОЙ МЕДИЦИНЫ Лекарства для индукции овуляции Руководство для пациентов ИНФОРМАЦИОННАЯ СЕРИЯ ДЛЯ ПАЦИЕНТОВ Опубликовано Американским обществом репродуктивной медицины под руководством

Дополнительная информация

Синдром поликистозных яичников

Синдром поликистозных яичников Что такое синдром поликистозных яичников? Синдром поликистозных яичников (или СПКЯ) - распространенное заболевание, которым страдают от 3 до 5% женщин репродуктивного возраста.Связано с гормональным дисбалансом,

Дополнительная информация

Лист часто задаваемых вопросов об аномальном маточном кровотечении

Лист часто задаваемых вопросов об аномальном маточном кровотечении Что такое аномальное маточное кровотечение? В нормальных условиях матка женщины проливает ограниченное количество крови во время каждого менструального цикла. Кровотечение между

г. Дополнительная информация

ЦЕЛИ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ

ЦЕЛИ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ ЦЕЛИ: 1.Перечислите органы и функции репродуктивной системы. Женские органы Функции мужских органов 1 ЯИЧНИКИ 1 ИСПЫТАНИЯ 1 Производят гаметы 2 маточные трубы 2 мошонка

Дополнительная информация

Миома матки (лейомиома)

Миома матки (лейомиома) Что такое миома матки? Миома матки - довольно распространенное доброкачественное образование (не рак) в матке. Они встречаются примерно у 25–50% всех женщин. Многие женщины с миомами

Дополнительная информация

Менструация и менструальный цикл

Менструация и менструальный цикл В: Что такое менструация? A: Менструация - это ежемесячное женское кровотечение, также называемое менструацией.Во время менструации ваше тело сбрасывает слизистую оболочку матки (матки).

Дополнительная информация

Репродуктивные технологии. Глава 21

Репродуктивные технологии Глава 21 Вспомогательное оплодотворение Когда пара находится в субфертильном состоянии или бесплодна, им может потребоваться вспомогательная репродукция, чтобы забеременеть: Заменить источник гамет Сперма, ооцит или зигота

Дополнительная информация

Политика в области фертильности Tower Hamlets CCG

Политика CCG в Тауэр-Хамлетс в области фертильности Утверждена в декабре 2014 г. Введение CCG в Башне-Хамлетс отвечает за ввод в эксплуатацию ряда медицинских услуг, включая больничные, психиатрические и общественные услуги

Дополнительная информация

Размножение у млекопитающих

Размножение у млекопитающих A.Введение 1. Органы мужской и женской репродуктивной системы обеспечивают продолжение вида. 2. Они делают это, производя гаметы и предоставляя метод

. Дополнительная информация

ЛЕКЦИЯ 10: РЕПРОДУКТИВНЫЕ СИСТЕМЫ

ЛЕКЦИЯ 10: РЕПРОДУКТИВНЫЕ СИСТЕМЫ ВВЕДЕНИЕ Единственная система, которая не является необходимой для жизни, но обеспечивает непрерывное существование человека. Однако все живые организмы должны воспроизводиться, чтобы продолжать свой вид.

Дополнительная информация

Глава 28: Репродуктивная система

I. Анатомия мужской репродуктивной системы A. Мошонка 1. Что содержит мошонка? 2. Неполная соединительнотканная перегородка разделяет мошонку на 3. Внешне мошонка имеет неровный гребень

Дополнительная информация

Половое размножение у человека

Половое размножение у человека Название: ПОЧЕМУ ЧЕЛОВЕКАМ НУЖНО РАЗМНОЖИТЬСЯ? Причина, по которой люди размножаются, заключается в том, чтобы иметь детей, чтобы наш вид мог продолжать существовать.Люди размножаются половым путем, что означает

Дополнительная информация

Фертильность и женщины с раком

Фертильность и женщины, больные раком. Хотя не все в конечном итоге заводят детей, большинство людей хотят, по крайней мере, иметь возможность. Рак и лечение рака иногда могут усложнить задачу или даже потребовать

Дополнительная информация

ПЕРЕДАЧА ЭМБРИОНОВ БОРА Козы

ПЕРЕДАЧА ЭМБРИОНА ЭМБРИОНА БОРА КОЗЫ Хорошее управление Без сокращений ПЛАН ВПЕРЕД ИЗБЕЖАНИЕ СТРЕССА Вот несколько примеров того, как вызывается стресс: Смешивание групп или отдельных животных вместе, которые ранее не были вместе.

Дополнительная информация .

Смотрите также